一、动物血清血浆储存温度分级选择
动物血清、血浆中富含蛋白、酶类、活性因子,温度波动会直接造成活性降解,不同储存周期对应专属低温区间:
短期周转(1~7 天):-20℃冷冻保存,适合实验室短期实验备用,可满足常规检测、细胞培养临时取样需求;
中长期留存(1~12 个月):-80℃超低温冰箱储存,能大程度保留蛋白、激素、酶活性,适配标准样本库、药物检测样本;
长期留样(一年以上):液氮罐气相冷冻,温度稳定 - 196℃,几乎无活性损耗,多用于标准质控血浆、实验动物血清长期存档。
常温、4℃冷藏仅可临时放置不超过 4 小时,严禁长时间存放,极易滋生细菌、蛋白变性浑浊。
二、分装预处理保质要点
分装前过滤除菌:采用 0.22μm 无菌滤膜过滤,去除血细胞残渣、微生物,减少储存期间变质风险;
定量小份分装:按照单次实验用量分装至冻存管,避免反复冻融。每次冻融都会破坏蛋白结构,反复 3 次以上样本基本失效;
管体密封处理:冻存管拧紧后缠封口膜,防止低温下水汽渗入、样本挥发,同时避免交叉污染。
三、冷冻、解冻规范操作
冷冻流程
梯度降温:室温静置后先放 - 20℃预冻 4h,再转入 - 80℃,快速骤冷易形成大冰晶,刺破蛋白结构,降低血清血浆活性。
解冻流程
优先 37℃水浴轻柔摇晃解冻,全程避光;
完全融化后低速离心,去除蛋白沉淀;
一次用不完剩余样本不可再次冷冻,直接废弃。
四、储存环境管控防变质
避免频繁开关冰箱门,温度骤升骤降会加速样本降解;
冻存管分区摆放,预留风道,保证箱内温度均匀;
定期除霜,霜层过厚会降低制冷效率,造成局部温度升高;
避光储存,紫外线会氧化血浆内活性物质,冻存箱尽量遮光。
五、变质判断与风险规避
储存失效典型表现:液体浑浊、大量白色蛋白沉淀、异味、分层严重,出现以上情况不可用于细胞培养、理化检测。 额外保质手段:无添加血清不可添加防腐剂;若需延长短期保存,可合规添加专用蛋白保护剂,不可随意加入酸碱试剂。
六、样本台账管理
动物血清血浆每管标注动物种类、采集日期、批次、储存温度、分装量,建立出入库记录,做到先进先出,减少样本长期积压过期。