人血清、血浆是临床检测、生物实验、抗体分析、生化指标研究的核心基础样本，样本质量直接决定实验数据准确性与重复性。取样不规范、分离不彻底、分装操作不当，极易造成溶血、蛋白降解、污染、反复冻融等问题，导致实验失效、数据偏差。为统一实验室操作标准，保障人血清血浆样本完整性与有效性，本文制定标准化取样与分装实操指南。
一、实验前期准备规范
1. 耗材准备：使用无菌无酶采血管、离心管、冻存管、移液枪头，所有耗材需无热源、无溶血污染、无核酸酶残留。血清、血浆样本耗材单独专用，避免与普通实验耗材混用，防止交叉污染。
2. 设备预处理：提前调试离心机、超净台、低温冰箱，确认设备运行稳定。离心机提前预冷至4℃，超净台紫外灭菌30分钟以上，保证操作环境无菌洁净。
3. 人员防护：全程佩戴一次性手套、口罩、实验服，严格遵循生物安全操作规范，避免手部接触样本、管口，防止人为污染与生物风险。
4.样本前期静置：全血采集后避免剧烈震荡，竖直静置，防止红细胞破裂引发溶血，为后续分离操作做好准备。
二、人血清取样分离操作步骤
血清为血液自然凝固后析出的上清液，不含抗凝剂，适用于生化、免疫、抗体检测等实验。
1. 自然凝固：将无抗凝全血样本室温竖直静置30～60分钟，让血液充分自然凝固，形成血凝块，严禁快速震荡、低温急冻凝固。
2. 低温离心分离：静置完成后，将采血管平稳放入预冷离心机，设置转速3000r/min，离心10～15分钟。离心后样本分层明显，上层为淡黄色澄清血清，下层为血凝块与红细胞。
3. 血清吸取取样：在超净台内缓慢吸取上层澄清血清，吸取过程中避开中间白细胞层与下层红细胞，严禁吸到血凝块。若样本存在轻微絮状物，可二次低速离心过滤，保证血清澄清无杂质。
4. 溶血样本剔除：肉眼观察血清出现发红、浑浊溶血现象，直接废弃，不得用于实验检测，避免影响指标结果。
三、人血浆取样分离操作步骤
血浆为全血添加抗凝剂后离心得到的上清液，含纤维蛋白原，适用于凝血功能、流变学、大分子物质检测实验。
1. 抗凝混匀处理：使用含EDTA、肝素或柠檬酸钠抗凝采血管，采血后立即轻柔颠倒混匀5～8次，保证抗凝剂与全血充分融合，防止局部凝血、产生微小凝块。禁止剧烈摇晃，避免机械溶血。
2. 低温高速离心：混匀后即刻上机离心，4℃、3500r/min离心15分钟，充分分离血浆、白细胞、红细胞层，保证上层血浆清亮透明。
3. 血浆取样提取：平稳取出样本，小心吸取上层淡黄色血浆，避开中层白膜层，杜绝细胞杂质混入，保证血浆纯度。若需高纯度血浆，可进行二次离心提纯。
四、标准化样本分装实操规范
血清、血浆样本不宜大体积冻存，反复冻融会破坏蛋白、酶类、活性因子，导致样本失效，必须规范分装保存。
1. 分装环境要求：全程在无菌超净台内低温操作，操作过程快速高效，减少样本室温暴露时间，防止蛋白降解、微生物污染。
2. 分装体积控制：根据常规实验用量分装，常用单管体积200μL、500μL、1mL，按需分装，做到一次取用、一次用完，从根源杜绝反复冻融。
3. 样本标记规范：每支冻存管清晰标注样本类型(血清/血浆)、样本编号、采集时间、批次、操作人员信息，字迹清晰耐磨，避免样本混淆、追溯困难。
4. 分装操作细节：移液枪精准控量，避免管壁残留、体积误差；分装后瞬时扣紧管盖，轻弹管底使样本沉底，简短离心去除管盖气泡，防止漏液、污染。
五、关键质控与禁忌要点
1. 严控溶血风险：剧烈震荡、温差过大、离心速度不当均会引发溶血，溶血样本不可用于生化、免疫、蛋白检测。
2. 杜绝反复冻融：血清血浆活性物质对温度敏感，反复冻融会导致蛋白变性、指标失真，分装为单次用量是核心质控手段。
3. 严控暴露时间：室温放置时间过长会导致样本降解、细菌滋生，取样分装全程快速操作，室温暴露尽量不超过30分钟。
4. 严禁样本交叉污染：不同批次、不同组别样本分开操作，枪头一次性使用，设备台面及时消毒，避免交叉污染影响实验结果。
六、分装后暂存与冻存要求
分装完成的人血清血浆样本，短期实验可置于4℃冷藏暂存(不超过24h)；长期保存需立即转入-20℃或-80℃低温冰箱冻存，梯度降温存放，避免温度骤变破坏样本活性。同时建立样本台账，统一编号管理，做到样本可查、数据可追溯。
七、结语
人血清血浆的取样分离与分装操作，是生物实验、临床检测的前置核心工序。规范的静置、离心、取样、分装流程，可有效规避溶血、污染、蛋白降解、反复冻融等常见问题，大程度保留样本生物活性与理化特性，保障后续实验数据真实、准确、可重复，为各类生物研究与临床检测提供合格样本基础。
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更新时间：2026-07-22
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